包含比浊法中的ppt指什么意思的词条

admin 2024-01-05 views 0

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麦氏标准比浊法原理是什么?怎么做

麦氏标准比浊法的原理是:麦氏比浊法又称Mcforland比浊法,它是根据细菌溶于水中存在一定的混浊度来测定细菌的浓度,是一种比较简单粗列的计算细菌浓度的方法。一般Mcforland比浊法有5个标准管,分别代表不同的浓度,我们可以用肉眼来比较你所测的细菌管和哪个标准管浊度相似,即可判定浓度。另外,也可用分光光度计来和标准管来比较,而算出你的浓度。

操作方法:

1.

轻摇标准试管。

2.

无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3.

以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

麦氏比浊法

在临床微生物学检验中,麦氏比浊法常用于细菌鉴定、药敏实验前配置菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时,相当于1.5×108细菌数/ml,由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大,除了真菌孢子,细菌的差别不大,结果不会有影响。但是,标准比浊管的浓度,是药敏实验结果的影响因素之一。

K-B法药敏试验时接种物配制有两种方法,第一种是肉汤增菌法(对数生长法),是用接环挑取3-5个细菌菌落入肉汤增菌管中进行增菌4-6小时,然后用生理盐水或肉汤对增菌管中的培养物进行稀释校正使其浓度达到0.5麦氏比浊标准(因为经过增菌培养其培养物浓度一般都高于此标准)。第二种方法是直接菌落法:从孵育18-24小时的非选择性培养基上,挑取3-5菌落,直接用肉汤或盐制成悬液作为接种,然后将浊度调整至0.5麦氏比浊标准。此法是检测苛养菌(如嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌)和潜在的对甲氧西林耐药的葡萄球菌的推荐方法。

0.5麦氏比浊管配制方法:

0.048M

BaCL2

(1.17%

W/V

BaCL2

.

2H2O)

0.5ml

0.36N

H2SO4

(1%,

V/V)

99.5ml

将二液混合,置螺口试管中,放室温暗处保存。用前混匀。有效期为6个月。

应用时,可目测或使用比浊仪即可。

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先弄清原理,再分析就知道了

免疫比浊发分析可以分为哪几类型?

1、光路系统

容纳反应盘的区域是检测组件,其内包含一个凝固法通道和一个发色底物法或免疫比浊法通道:

散射比浊法:所有ACL系统均有。使用660nm波长光散射检测凝固形成。

发色底物法/免疫比浊法:405nm,检测光吸收。

2、检测原理

1)散射比浊法(凝固法)检测

散射比浊法(凝固法)检测是指检测和记录血浆样本凝固的时间。该技术通过检测光散射的变化来确定凝固终点。

散射比浊法/凝固法,样本和试剂反应时,纤维蛋白原转化为纤维蛋白,光通过该反应介质,从而发生光散射。660nm光通过血浆,并在900角配备光传感器进行检测光信号。

纤维蛋白原凝固过程伴随着光散射信号的增强。随着所检测到的光信号的变化,光电探测器所检测到的电信号也随之变化。变化的电信号通过软件一系列的数学算法判定凝固终点。

2)发色底物法(图示:间接发色底物法)

发色底物法可分为直接和间接发色底物法。

直接法:分析物直接结合在特异性的发色底物上。比如:蛋白C、纤溶酶原PLG。

间接法:通过改进的测试体系,加入过量的具有反应活性的酶和能与待测物结合的物质,最后利用特异性合成底物结合剩余的酶,检测其活性,达到检测目的。比如:肝素、AT-III。

大多数情况下,在405nm处,通过检测合成底物中的对硝基苯胺(pNA)的吸光度值。

发色底物法通道利用比色原理检测反应杯中的吸光度变化值。405nm光源,穿过反应杯,并通过光学感应器进行接收。反应杯中的吸光度值与pNA的浓度成正比。光路检测器上接收到的光信号转换为电信号,此电信号与酶的活性成正比。

3)免疫比浊法

免疫比浊法是指直接检测和记录分析物的浓度。该方法通过检测光密度值的变化来检测分析物的物理浓度,而并非其活性。与透射比浊法一样,免疫比浊法依赖抗原抗体复合物的形成,从而检测透光度值的变化。

ACLTM 8/9/10000系统通过检测405nm通道的光密度值,与参比乳胶液对照得出结果。

使用405nm波长,通过检测反应杯中的吸光度值(ΔA)。透过反应杯的光通过光传感器进行检测。反应杯中液体吸收光信号的多少,直接与抗原抗体复合物的浓度成正比。光路检测器上接收到的光信号转换为电信号,此电信号与酶的活性成正比。

“PEG沉淀比浊法”是什么?

PEG沉淀比浊法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光线的强度。在水质监测和管理过程中,比浊法常用于测量饮用水、工业用水、废水的透明度;也用于测量空气及其他各种气体中悬浮固体的含量,是空气和水污染研究的一种工具。在酿造工业中,比浊法常用于各种饮料澄清过程的控制和过滤过程的监控。在分析化学上,可通过生成悬浮沉淀的反应产物来测定某些元素的浓度,例如,通过生成硫酸钡悬浮物来测定Ba2+ 或SO2-,以及在煤、焦炭、油、橡胶中的总硫量;通过生成硫化银和氯化银悬浮物来测定Ag+或Cl-;在容量分析中,浊度测量也可用于确定滴定终点,如用钙盐滴定氟化物、用银盐滴定溴化物、用钡盐滴定硫酸盐等。在生物化学中,比浊法广泛用于测定液体食品中细菌的生长量及氨基酸、维生素和抗生素等。根据悬浮体系中粒子的沉降速度与其半径的平方成正比的原理,比浊法可用于不同大小粒子沉降速度的监测和粒子大小的分类。

给分吧

测定微生物生长量的时候,有一种方法叫做比浊法。哪位高手介绍下什么叫比浊法?详细点。

比浊法又称浊度测定法,原理是悬浮颗粒在液体中造成透射光的减弱,减弱的程度与悬浮颗粒的量相关,据此可定量测定物质在溶液中呈悬浮状态时浓度的方法。也就是利用培养液中微生物的数量不同造成的吸光度差异来确定微生物的生长量。比浊法和比色法所依据的原理是相同的,实验方法也相似。通常,比色计或分光光度计都可用于比浊分析。也有专门用于比浊分析的仪器,即浊度计或比浊计。

比色比浊原则是什么

分类: 理工学科

问题描述:

比色比浊原则是什么?

解析:

比色法

用比色法测定时,应取对照品同时操作。除另有规定外,比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供试品溶液, 然后依次加入等量的相应试剂,并用同样方法处理。在规定的波长处测定对照品和供试品溶液的吸收度后,按紫外分光光度法项下(1)对照品比较法的计算式计算供试品浓度。

当吸收度和浓度关系不呈线性时,应取数份梯度量的对照品溶液,用溶剂补充至同一体积,显色后测定各份溶液的吸收度,然后以吸收度与相应的浓度绘制标准曲线,再根据供试品的吸收度在标准曲线上求出其含量。

比色法用比色法测定时,应取对照品同时操作。除另有规定外,比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供试品溶液, 然后依次加入等量的相应试剂,并用同样方法处理。在规定的波长处测定对照品和供试品溶液的吸收度后,按紫外分光光度法项下(1)对照品比较法的计算式计算供试品浓度。...

透射比浊法(Turbidimetry):根据Lambert-Beer定律,当一束光线通过带有微小粒子的悬浮液和胶体溶液时,此溶液受到光散射和光吸收两个因素影响可使光的强度减弱,减弱的程度与溶液中微小粒子的含量成正比。所以,当光线通过免疫复合物时,由于反应体系中复合物颗粒对光线的反射和吸收,引起透射光减少,测量通过反应体系后的透射光照到光电倍增管的光强度,或者测定反应体系的吸光度,推导出溶液中待测物质的浓度。

散射比浊法(Nephelometry):根据Rayleigh定律,粒子被光照射后而发光,发光的轻度与粒子的大小以及照射光的角度有关。当光线通过免疫复合物时,由于反应体系中复合物颗粒可被光线折射,发生偏转;而这种偏转的角度可因光线波长和颗粒大小不同而有所区别;通过测量在入射光的一定角度上复合物颗粒发出的散射光强度,推导出溶液中待测物质的浓度。根据测定方式的不同,散射比浊法又分为速率散射比浊法(Rate nephelometry)和终点散射比浊法(End point nephelometry)。

速率散射比浊法是一种抗原、抗体结合的动态测定法。所谓速率是指抗原——抗体在单位时间内结合的速度。速率法是测定最大反应速率,也就是抗原——抗体反应达到最高峰时形成免疫复合物的量。一般这个时间是几十秒,峰值的高低与待测物质(抗原)的量成正比,而形成峰值的时间与抗体(试剂)的浓度和其与抗原的亲和力有关。

终点散射比浊法是观察抗原和抗体反应达到平衡时,免疫复合物形成的量不再增加,反应体系的浊度不再变化,测定此时的溶液浊度。一般这个过程需要几十分钟,复合物的浓度不再受时间变化的影响,应当说是免疫反应的结束,但又不能出现絮状沉淀影响浊度的判断。

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